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> 抗體制備技術平臺 |
階段一
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按照標準免疫程序免疫5只Balb/c小鼠。采用ELISA法測定血清滴度。
大約需要3-4mg蛋白免疫原或2mg多肽-KLH交聯物作為免疫原。 2mg多肽-BSA交聯物作為篩選用抗體。
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階段二
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當血清中抗體滴度達到融合要求后，進行細胞融合。
ELISA方法檢測雜交瘤細胞培養上清，篩選出抗體陽性的雜交瘤細胞克隆，進行克隆化，篩選出穩定分泌抗體的克隆，擴大培養。
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階段三
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測定抗體Ig的亞型。
將雜交瘤培養上清送客戶評價。
提供客戶選擇的3-5個克隆生產腹水（每只小鼠可獲得1-4ml腹水）。
提供3-5株雜交瘤細胞株。
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操作
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天數
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備注
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免疫
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0
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首次免疫 150-500ug/只，與弗氏完全佐劑混合，皮下多點注射 |
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21
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再次免疫 相同劑量與弗氏不完全佐劑混合，皮下多點注射 | |
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42
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加強免疫 相同劑量與弗氏不完全佐劑混合，皮下多點注射 | |
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70
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加強免疫 相同劑量與生理鹽水混合，耳靜脈注射 | |
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采血
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0
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采集對照血清，2ml |
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77
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采集血清2ml，測效價 | |
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78
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放血，約30-50ml血清/兔 |
